科學識別超濾離心管出現的問題并采取針對性措施是實現長期穩定的關鍵
點擊次數:48 更新時間:2026-01-07
超濾離心管是一種集離心與分子篩分功能于一體的實驗室耗材,廣泛應用于蛋白質濃縮、脫鹽、緩沖液置換及核酸純化等生物化學操作。其核心為內置截留分子量的超濾膜,通過離心力驅動小分子透過膜而大分子被截留。盡管操作簡便,但在實際使用中可能會因選型錯誤、操作不當或保存不善導致回收率低、堵塞、破裂或交叉污染等問題,嚴重影響實驗結果。科學識別超濾離心管出現的問題并采取針對性措施,是實現長期穩定過濾的關鍵。

一、濃縮效率低或無法濃縮
原因:膜孔徑(MWCO)選擇過大、樣品黏度過高、離心參數不足。
解決方法:
確保目標分子量≥2–3倍MWCO(如50kDa蛋白應選10K或30K管);
高黏度樣品(如細胞裂解液)先低速預離心去除碎片,或稀釋后處理;
按說明書設置離心力(通常1,000–14,000×g)和時間,避免過低轉速導致通量不足。
二、濾膜堵塞或流速驟降
原因:樣品含顆粒雜質、脂質或高濃度蛋白聚集。
解決方法:
上樣前用0.45μm或0.22μm濾器預過濾;
對含脂樣品,加入適量去垢劑(如0.1%Tween-20)減少膜吸附;
采用“間歇離心法”:離心5分鐘→暫停1–2分鐘→再離心,緩解濃差極化。
三、目標物回收率低
原因:非特異性吸附、膜結合、殘留體積過大。
解決方法:
選用低吸附型超濾管(如帶親水涂層的RC膜);
濃縮后用少量原緩沖液反向洗滌濾膜上表面,提高洗脫率;
選擇“死體積”小的型號(部分產品可低至<5μL),減少樣品滯留。
四、離心管破裂或漏液
原因:超速離心、管體老化、未配平。
解決方法:
嚴格遵守離心力限制(標注于管壁),切勿超限使用;
檢查管體是否有劃痕、白化或脆化,一次性耗材禁止重復高壓滅菌;
離心前務必對稱配平(質量差≤0.1g),使用適配套管。